Weiß ich jetzt so nicht, aber kannst du ja mal durchprobieren, sieh dafür in der hilfe von FileOpen genauer nach :). Ansonsten erstell ne signatur und sieh dir die datei mit z.b. notepad++ an, dort steht dann das format unter kodierung (wird dort aber auch nur analysiert, genau festgelegt ist es meistens nicht)
ok stimmt gute idee..
das txt file ist mit UCS-2 Little Endian erstellt wurden
das htm file ist mit Windows 1252 erstellt wurden
ich schreibe mal folgendes mit in die htm mit rein:
<head>
<meta http-equiv=Content-Type content="text/html; charset=windows-1252">
</head>eventuell geht es dann 
Hast du es schon mit den HTML-Codes für die Umlaute probiert? Sofern die HTML in der Signatur dargestellt wird kannst du ja auf äöü verzichten und stattdessen mal die Codes verwenden.
&aauml; ä
&Aauml; Ä
ö ö
Ö Ö
ü ü
Ü Üja habe ich schon gemacht:
For $line = 1 To UBound ($lines) -1
$lines[$line] = StringReplace ($lines[$line], "Ä", 'Ä', "", $STR_CASESENSE)
$lines[$line] = StringReplace ($lines[$line], "ä", 'ä', "", $STR_CASESENSE)
$lines[$line] = StringReplace ($lines[$line], "Ö", 'Ö', "", $STR_CASESENSE)
$lines[$line] = StringReplace ($lines[$line], "ö", 'ö', "", $STR_CASESENSE)
$lines[$line] = StringReplace ($lines[$line], "Ü", 'Ü', "", $STR_CASESENSE)
$lines[$line] = StringReplace ($lines[$line], "ü", 'ü', "", $STR_CASESENSE)
$lines[$line] = StringReplace ($lines[$line], "ß", 'ß', "", $STR_CASESENSE)
Nextaber in der txt datei kann ich dies nicht anwenden und dort sind die Umlaute auch falsch 
ich benutzte für die Generierung eine html vorlage und ersetzte Platzhalter.
Man müsste wissen welche Codierung die Vorlage haben muss und was ich dann genau bei FileOpen mit angeben muss....
Klingt so, als würdest du versuchen die "OutlookSignature.exe" nachzuschreiben - ein Programm, das es bereits gibt.
Das einzige Encoding, das AutoIt von Haus aus beherrscht und auch auslesen kann ist das der htm-Datei: UTF-16LE. Die txt-Datei hat das windows-1252 encoding. Und die RTF... standard RTF eben: "A standard RTF file can consist of only 7-bit ASCII characters, but can encode characters beyond ASCII by escape sequences."
Klingt so, als würdest du versuchen die "OutlookSignature.exe" nachzuschreiben - ein Programm, das es bereits gibt.
kann sein kenne ich nicht...aber meines ist mit ad anbindung und so schnickschnack
so ich habe es gerade mal mit der älteren 3.3.8.1 version von autoit probiert....damit geht es!!! 
woran liegt das?
neues ist wohl nicht immer das beste 
Schau Dir mal die "Script breaking changes" von AutoIt an. Da stehen solche Sachen normalerweise drin.
Bei der Funktion "FileOpen" kannst Du das gewünschte encoding angeben. Vielleicht hilft das.
Keine Ahnung, das musst Du leider selber rausfinden.